《环境微生物学实验》教学大纲
(Experiment of Environmental Microbiology)
一、基本信息
课程代码：2300812
学 分：1.5
总 课 时：45
课程性质：必修课
适用专业：适用本科环境工程、环境科学专业
先修课程：微生物学
二、本课程教学目的和任务
环境微生物学实验是环境学科生物学重要的基础课之一，特别是随着分子生物学的发展与拓宽，微生物学方法与技术显得尤为重要。此外，医学、农学、林学等学科，甚至地质学、太空学等也需微生物的方法与技术。因此，熟悉掌握微生物学方法与技术，对其它很多学科的发展有直接的影响。无菌操作技能和无菌概念的建立是微生物学实验中最重要的内容，并且可以培养学生的动手能力。
本课程的任务：
1.环境微生物学实验主要任务是使学生掌握研究与应用微生物的主要方法与技术，包括经典的、常规的、以及现代的方法与技术，使学生具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能。
2.与微生物学基础理论课紧密结合，使学生将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，提高学生的综合能力与创新意识。
3.提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所出现的问题点样分析，并加以解决。
三、教学方法与手段
以学生自己动手为主，老师在适当时间予以提示；对实验中所出现的一些现象多向学生提出问题，使它们学会分析结果，并与理论知识有机结合；根据实验的进行程度，引导学生更深入思考，逐步树立他们的创新意思；严格要求使操作技能规范化，老师作示范，强调其要点学生自己练。
四、教学内容及要求
实验一：显微镜的使用及细菌形态的观察（3课时）
要求掌握显微镜的使用方法；熟悉显微镜的构造；了解细菌的形态差异。
重点内容：油镜的使用方法。
难点内容：油镜的使用方法。
实验二：细菌涂片制备及染色（3课时）
要求掌握细菌涂片的制备及革兰氏染色的方法和关键步骤；熟悉革兰氏染色所需试剂及其作用；了解革兰氏染色的机理及其在细菌分类鉴定中的重要性。
重点内容：革兰氏染色的方法和关键步骤。
难点内容：革兰氏染色的操作。
实验三：玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌（3课时）
要求掌握微生物实验常用玻璃器皿的清洗和包扎方法；熟悉干热灭菌的操作技术；了解干热灭菌的原理和应用范围。
重点内容：微生物实验常用玻璃器皿的清洗和包扎和干热灭菌操作。
难点内容：玻璃器皿的包扎。
实验四：常用培养基的配制和湿热灭菌（3课时）
要求掌握配制培养基的一般方法和步骤；熟悉高压灭菌锅的构造和使用方法；了解培养基的配制和湿热灭菌的原理。
重点内容：配制培养基的一般方法和步骤。
难点内容：湿热灭菌的原理。
实验五：细菌的分离、接种和培养（6课时）
要求掌握倒平板的方法和微生物的接种技术；熟悉几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征。
重点内容：倒平板的方法和微生物的接种技术。
难点内容：微生物无菌操作技术。
实验六：酵母菌、霉菌、放线菌的培养及形态观察（6课时）
要求掌握酵母菌、霉菌、放线菌的一般形态特征及其区别；了解各菌群落的形态及出芽生殖方式和血球计数板计数的原理。
重点内容：酵母菌、霉菌、放线菌的一般形态特征
难点内容：血球计数板原理及操作。
实验七： 微生物荧光检测法（3课时）
要求掌握利用荧光显微镜观察微生物形态或特殊物质的基本方法；了解荧光定量的的基本原理。
重点内容：荧光显微镜的操作。
难点内容：常见微生物的分类特征。
实验八： 污水中菌落总数的测定及常见微生物观察（6课时）
要求掌握国标中关于水中细菌总数的测定基本原理和方法；熟悉相关操作流程；了解取样规程；观察生活污水处理中的常见微生物的形态及特征。
重点内容：水中细菌总数的测定的基本原理和方法。
难点内容：水中细菌总数的测定的基本原理和方法。
实验九： 水体藻类计数及叶绿素含量分析（6课时）
要求掌握水体藻类监控的基本原理和方法，要求学生查阅文献后自行设计实验方案，经教师确认后进行实验；熟悉相关操作流程，独立完成全过程。
重点内容：藻类计数基本原理和方法。
难点内容：藻类计数基本原理和方法。
实验十：污水中大肠菌群的测定（6课时）
要求掌握国标中关于水中大肠菌群测定基本原理和方法，要求学生查阅文献后自行设计实验方案，经教师确认后进行实验，独立完成全过程；熟悉相关操作流程；了解取样规程。
重点内容：水中大肠菌群测定的基本原理和方法。
难点内容：水中大肠菌群测定的基本原理和方法。
五、教学时数分配表
|
序号
|
实 验 名 称
|
实验类型
|
实验要求
|
实验时数
|
|
1
|
显微镜的使用及细菌形态的观察
|
验证性
|
必做
|
3
|
|
2
|
细菌涂片制备及染色
|
验证性
|
必做
|
3
|
|
3
|
玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌
|
验证性
|
必做
|
3
|
|
4
|
常用培养基的制备和湿热灭菌
|
验证性
|
必做
|
3
|
|
5
|
细菌的分离、接种和培养
|
验证性
|
必做
|
6
|
|
6
|
酵母菌、霉菌、放线菌的培养及形态观察
|
验证性
|
必做
|
6
|
|
7
|
微生物荧光检测法
|
验证性
|
必做
|
3
|
|
8
|
污水中菌落总数的测定及常见微生物观察
|
验证性
|
必做
|
6
|
|
9
|
水体藻类计数及叶绿素含量分析
|
设计性
|
必做
|
6
|
|
10
|
污水中大肠菌群的测定
|
设计性
|
必做
|
6
|
|
教学课时合计
|
45
|
六、考核方式及成绩评定标准
考核方式：实验报告
成绩评定标准：平时成绩占总成绩的50%（其中出勤占30%，实验报告占70%），期末考试占总成绩的70%。成绩评定为百分制。
七、教材及主要参考书
教材：沈萍，范秀容，李广武主编，微生物学实验，第三版，高等教育出版社，1999.6
参考书目：[1]、赵斌，何绍江主编，微生物学实验，科学出版社，2002.8
[2]、唐丽杰主编，微生物学实验，哈尔滨工业大学出版社，2004.11
[3]、杨革主编，微生物学实验教程，科学出版社，2004.9
执笔人:都韶婷